Description
La cámara de recuento es de vidrio. En el centro del portaobjetos hay un rectángulo de 15 x 20 mm, flanqueado por rebordes 0,1 mm más altos a cada lado. El cubreobjetos se apoya sobre estos rebordes, dejando una profundidad de 0,1 mm entre la parte inferior del cubreobjetos y el rectángulo.
Tanto el rectángulo como el cubreobjetos tienen superficies ópticamente planas. Para facilitar la calibración del microscopio, el rectángulo tiene dos líneas paralelas grabadas con una separación de 1,382 mm. Se dispone de un micrómetro ocular adicional, que se divide en cuadrados, cada uno de los cuales equivale a 1/6 del diámetro de la abertura del diafragma del ocular. Para el recuento de mohos, el microscopio debe proporcionar un área de 1,5 mm² (círculo de 1,382 mm de diámetro) con una ampliación de 90-125. Cámara de Recuento de Mohos Howard.
Número de Catálogo: 3820 PRODUCTOS DE TOMATE (NO DESHIDRATADOS) #42.57 Para realizar recuentos de mohos en productos de tomate, utilice el jugo y el cátsup tal como salen del envase. Si es necesario, añada goma limpia, libre de moho y soluble en agua para obtener preparaciones más uniformes; en el caso de puré o pasta, mezcle H₂O para obtener un contenido total de sólidos de tomate del producto diluido de 8.37-9.37%. Limpie la celda Howard para que se formen anillos de Newton entre el portaobjetos y el cubreobjetos. Retire el cubreobjetos y coloque una pequeña gota de la muestra bien mezclada sobre el rectángulo central. Con una cuchilla o bisturí, extienda la gota uniformemente sobre el rectángulo y cubra con el cubreobjetos para que se distribuya uniformemente.
Use solo la cantidad de muestra necesaria para que el material llegue al borde del rectángulo. (Es fundamental que la gota se tome de una muestra bien mezclada y se extienda uniformemente sobre el rectángulo. De lo contrario, al colocar el cubreobjetos, el material insoluble y, en consecuencia, los mohos, podrían ser más abundantes en el centro de la preparación). Deseche cualquier preparación que presente una distribución irregular o ausencia de anillos de Newton, o líquido que se haya derramado sobre el foso y el cubreobjetos.
Coloque el portaobjetos bajo el microscopio y examínelo con un ajuste tal que cada campo de visión cubra 1,5 mm², lo que equivale a un círculo con un diámetro de 1,382 mm. Este ajuste se puede facilitar mediante el uso de las dos líneas paralelas grabadas en el lateral del rectángulo, separadas 1,382 mm. Con el instrumento correctamente ajustado, la cantidad de líquido examinado por campo es de 0,15 mm³. De cada una de dos o más preparaciones, examine al menos 25 campos, tomados de forma que sean representativos de todas las secciones de la preparación.
Observe cada campo, anotando la presencia o ausencia de filamentos de moho y registre los resultados como positivos o negativos, según corresponda. (Ningún campo se considerará positivo a menos que la longitud total de no más de 3 filamentos presentes supere 1/6 del diámetro del campo, que es igual a la distancia entre cualquiera de las dos líneas del micrómetro ocular Howard). Calcule la proporción de campos positivos a partir de los resultados del examen de todos los campos observados e informe el porcentaje de campos que contienen filamentos de moho. Si se desea mayor precisión, se deben contar más campos.
PODRES EN TOMATES ENLATADOS #42.60 Escurra el contenido de la lata durante 2 minutos en un tamiz n.° 2. Para envases de menos de 1,4 kg de peso neto, utilice un tamiz de 20 cm de diámetro; para envases de 1,4 kg o más, utilice un tamiz de 30 cm. Examine los tomates escurridos y registre la cantidad y el tamaño de las partes podridas presentes. Pase los tomates escurridos por un ciclón de laboratorio con aberturas de malla de aproximadamente 0,027″ de diámetro, o cepille a través de un tamiz n.° 30 con un cepillo de cerdas duras. Realice recuentos de moho tanto en el jugo escurrido como en los tomates despulpados, según se indica en 42.57.
SOPA DE TOMATE, ESPAGUETI ENLATADO, CARNE DE CERDO CON FRIJOLES Y SIMILARES PRODUCTOS QUE CONTIENEN SALSA DE TOMATE n.° 42.64 (a) Sopa de tomate con o sin crema. – Coloque el envase en agua caliente y caliente hasta que el contenido esté completamente caliente; luego abra. Transfiera 10 ml de sopa bien mezclada a un tubo de centrífuga de 50 ml y agregue 3 ml de solución de KOH (1×1). Revuelva hasta que el almidón de la sopa se disuelva y los tejidos se aclaren. Agregue suficiente agua para llenar el tubo y centrifugue. (El tiempo necesario para centrifugar la muestra varía considerablemente. Con una longitud del brazo de centrífuga de 5¼» y una velocidad de aproximadamente Se requieren 1600 rpm y unos 20 minutos para una muestra promedio.
En sopas espesas, la gelatinización de tanto almidón a veces interfiere con la sedimentación adecuada de los sólidos durante la centrifugación. Si el líquido permanece turbio, puede ser necesario desechar la muestra y comenzar de nuevo con solo 5 ml de sopa y continuar con los 3 ml habituales de KOH. Cuando el líquido sobrenadante esté transparente, viértalo. Si no está completamente transparente, verifique si el líquido sobrenadante contiene moho antes de desecharlo. Agregue suficiente H₂O al residuo en el tubo para alcanzar el volumen original de la sopa, mezcle y cuente el moho como se indica en 42.57. (b) Cerdo con frijoles, espagueti con salsa, espagueti con albóndigas o carne, ravioles, chili con carne y tamales.
– Coloque la lata sin abrir en H₂O caliente y caliente hasta que el contenido esté completamente caliente. Abra la lata y transfiera el contenido a un tamiz n.° 6. Escurra hasta que la mayor parte del líquido haya pasado. (Con algunos productos, la salsa se filtra inmediatamente, pero en el caso de algunos frijoles y espaguetis, puede requerirse 10 minutos o más). Mezcle bien la salsa, coloque 10 ml en un tubo de centrífuga y proceda como se indica en (a). Tenga cuidado con los productos que contienen carne para no confundir los filamentos de moho con las fibras musculares, que tienen un parecido superficial; las fibras musculares suelen ser mucho más gruesas y las estrías suelen ser visibles. (c) Sardinas u otros pescados con salsa de tomate: Caliente la lata en agua hirviendo y escurra la salsa como se indica en (b). Mezcle bien la salsa y coloque una porción en un tubo de centrífuga. Deseche el aceite y trate 10 ml de salsa bien mezclada con 3 ml de solución de KOH como se indica en (a). Tenga cuidado de diferenciar entre los filamentos de moho y las fibras musculares del pescado.
Cuente como se indica en 42.57. TOMATE DESHIDRATADO PRODUCTO # 42.65 (a) Cóctel de jugo de tomate
– Si es posible, determine la fórmula utilizada para preparar el cóctel deshidratado y, a partir de ella, calcule el porcentaje aproximado de sólidos de tomate. Multiplique este porcentaje por 34.36. El resultado será la cantidad de ml de disolvente que se utilizará para diluir 2 g del cóctel deshidratado y prepararlo para el recuento de mohos. (El factor de dilución se basa en un contenido de sólidos de tomate del 5.5% para el jugo de tomate). Pesar 2 g de muestra bien mezclada en un vaso de precipitados de 50 ml y agregar 50 ml de H₂O. Determinar el peso de la muestra, incluyendo el vaso y la varilla de agitación, antes de que se pierda humedad por calentamiento. Calentar la mezcla en un baño de vapor durante 10-15 minutos. Pesar el vaso de precipitados y agregar H₂O para reponer la humedad perdida por calentamiento.
Agregar suficiente solución de pectina al 4% para completar la diferencia entre 15 ml y el volumen calculado de líquido necesario para la dilución. Mezcle bien y proceda como se indica en la sección 42.57. Si no dispone de la fórmula o del contenido de sólidos de tomate del producto, diluya para el recuento de mohos añadiendo una cantidad de H₂O y la solución de pectina (mitad y mitad) igual a la cantidad de líquido especificada en las instrucciones para la preparación del producto para el consumo.
Disuelva los copos como se indica anteriormente y proceda como se indica en la sección 42.57. (b) Copos de tomate y copos para sopa de tomate: Determine, si es posible, la fórmula utilizada para elaborar los copos y, a partir de ella, calcule el porcentaje aproximado de sólidos de tomate. Multiplique este porcentaje por 21,88.
El resultado serán los ml de solución de hidrato de cloral necesarios para disolver 2 g del producto deshidratado en la preparación para el recuento de mohos. (El factor de dilución se basa en un contenido de sólidos de tomate del 8,37 % para el puré de tomate).
Si el producto consiste en hojuelas de tomate con almidón añadido, pero sin sólidos solubles en agua, determine el contenido total aproximado de sólidos de tomate de la mezcla seca mediante una dilución definitiva con un refractómetro y convirtiendo la lectura a sólidos de tomate. Si la lectura se refiere a sólidos solubles, corrija los sólidos de tomate insolubles, que representan aproximadamente el 1 % en el jugo de ciclón. (El promedio de sólidos solubles para el jugo de ciclón es de aproximadamente el 4,7 %). Pesar 2 g de muestra bien mezclada en un vaso de precipitados de 50 ml y agregar el volumen calculado de solución de hidrato de cloral (1 x 1).
Determinar el peso de la muestra, incluyendo el vaso y la varilla de agitación, antes de que se pierda humedad por calentamiento. Hervir la mezcla suavemente, removiendo durante 5 minutos o hasta que adquiera una apariencia gelatinosa. (Una mezcla demasiado transparente dificulta la visualización del moho).
Pesar el vaso de precipitados y agregar H₂O para reponer la humedad perdida. Mezclar bien y, si la mezcla permanece lechosa, calentar hasta casi hervir, removiendo constantemente.
Proceder como se indica en 42.57. Si no se puede determinar la fórmula o el contenido de sólidos de tomate del producto, se pueden realizar diluciones para el recuento de mohos con una base de 80% de sólidos de tomate para hojuelas de tomate y 40% de sólidos de tomate para hojuelas de sopa de tomate.
PODRIDEZ (BASADA EN EL RECUENTO DE MOHOS) #42.85 Pesar 10 g de una muestra de pimiento molido bien mezclada y transferir a una licuadora Waring o una batidora equivalente. Agregar 200 ml de NaOH al 1% en 3 o 4 porciones sucesivas, revolviendo la mezcla después de cada adición y eliminando con la última porción cualquier material adherido a las paredes de la licuadora. Agitar la mezcla en la licuadora durante 1 minuto.
Con una espátula de goma, frotar con la mezcla cualquier material adherido a las paredes de la licuadora y repetir la mezcla durante 2 minutos más. Agregar 2 o 3 gotas de alcohol caprílico para disolver la espuma resultante.
Mezclar 100 g de esta mezcla con 50 g de solución de pectina al 3% y realizar el recuento de mohos con una celda Howard como se indica en 42.57. En ocasiones, una mezcla preparada puede contener partículas de tejido inóculo que dificultan la obtención de anillos de Newton al preparar el portaobjetos para el recuento de mohos.
Para evitar esta dificultad, se ha diseñado una abrazadera para sujetar el cubreobjetos: una placa metálica con una abertura circular de 2,5 cm de diámetro en el centro de la placa; dos clips fijados al borde anterior de la placa sujetan el cubreobjetos en su posición al colocar el portaobjetos sobre ella. Para limpiar la cámara de recuento: Tras completar el recuento, retire el cubreobjetos y limpie la cámara con agua o una solución limpiadora suave (lejía al 10%). Seque la cámara con un paño suave, una toallita o enjuáguela con acetona.
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